引物是人工合成的两个寡核苷酸序列:一个引物与靶区域-端的一条DNA 模板链互补,另一个弓|物与靶区域另一端的另-条DNA模板链互补,其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点,核酸聚合酶可由其3 '端开始合成新的核酸链。

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引物设计合成

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简介：

引物合成是通过测定引物的OD值，溶解引物，最终合成引物的一个完善的过程

引物设计有3条基本原则：

首先引物与模板的序列要紧密互补，其次引物与引物之间避免形成稳定的二聚体或发夹结构，再次引物不能在模板的非目的位点引发DNA聚合反应（即错配）。具体实现这3条基本原则需要考虑诸多因素，如引物长度，GC含量，引物碱基分部，Tm值，引物特异性，形成引物二聚体及发夹结构的能值等等。

引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法：

亚磷酰胺三酯法合成DNA片段，具有高效、快速的偶联以及起始反应物比较稳定的特点。亚磷酰胺三酯法是将DNA固定在固相载体上完成DNA链的合成的，合成的方向是由待合成引物的3′端向5′端合成的，相邻的核苷酸通过3′→5′磷酸二酯键连接。引物合成特点A.引物合成的纯度高。B.合成的序列长.C.合成的效果好。

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