切片一e测试

预约须知

1.动物组织：处死动物后立即取材，生理盐水冲洗表面，4%的多聚甲醛固定，一般组织固定48h左右进行包埋最好（尽量不要固定过久），大小不超过1cm*1cm*0.5cm，装组织的管子一定要比组织大（避免挤压影响组织形态），固定液是样品体积的5倍以上，以保证充分固定，封口膜封好避免运输过程中固定液洒出。

2.植物组织：新鲜取材后固定于FAA固定液中，大小不超过1cm*1cm*0.5cm，如果组织悬浮于固定液上，可以抽真空使其下沉。

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项目介绍

1、取材：新鲜组织固定于4%多聚甲醛24h以上。将组织从固定液取出在通风橱内用手术刀将目的部位组织修平整，将修切好的组织和对应的标签放于脱水盒内。

2、脱水：将脱水盒放进吊篮里于脱水机内依次梯度酒精进行脱水。75%酒精4h-85%酒精2h-90%酒精2h-95%酒精1h-无水乙醇I 30min-无水乙醇II 30min-醇苯5-10min-二甲苯I 5-10min-二甲苯II 5-10min-蜡I 1h-蜡II 1h-蜡III 1h。

3、包埋：将浸好蜡的组织于包埋机内进行包埋。先将融化的蜡放入包埋框，待蜡凝固之前将组织从脱水盒内取出按照包埋面的要求放入包埋框并贴上对应的标签。于-20°冻台冷却，蜡凝固后将蜡块从包埋框中取出并修整蜡块。

4、切片：将修整好的蜡块置于石蜡切片机上切片，片厚4μm。切片漂浮于摊片机40℃ 温水上将组织展平，用载玻片将组织捞起，并放进60℃ 烘箱内烤片。待水烤干蜡烤化后取出常温保存备用。

样品要求

1.动物组织：处死动物后立即取材，生理盐水冲洗表面，4%的多聚甲醛固定，一般组织固定48h左右进行包埋最好（尽量不要固定过久），大小不超过1cm*1cm*0.5cm，装组织的管子一定要比组织大（避免挤压影响组织形态），固定液是样品体积的5倍以上，以保证充分固定，封口膜封好避免运输过程中固定液洒出。

2.植物组织：新鲜取材后固定于FAA固定液中，大小不超过1cm*1cm*0.5cm，如果组织悬浮于固定液上，可以抽真空使其下沉。

结果展示

切片

常见问题

切片弯曲且不能形成直带

●原因：①蜡块上下或左右两边不平行。②蜡块与切片刀刀口不平行。③组织块外形不整齐。④切片刀各处的锋利程度不一致。

●解决方法：①将蜡块四边反复修平对称。②调节蜡块夹持器，使其与切片刀平行。③修整组织块时，注意修切整齐。④移动切片刀，更换刀口位置。

切片上出现裂纹

●原因：①切片刀上有小缺口，或刀口不平整。②组织中可能含有较硬之物质，如固定液之结晶石灰质。③包埋时石蜡冻结太慢。

●解决方法：①切片刀某处有缺口，可调换刀口部位或重新磨刀。刀口上缺口过多且不平整，可先将刀锋垂直在磨刀石上轻轻磨数次，然后按常规磨刀田。②组织中硬性物质太多，则不宜用。③纠正包埋时的缺点。一般待蜡块周围凝结一层，即可放入冷水中。

切片粘在切片刀不易取下

●原因：切片时有静电作用，产生静电吸引，在冬季或气候干燥时常出现这种情况。

●解决方法：可用加湿器。以增加空气中的水分，而减少静电作用。