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生物透射电镜(生物TEM)(已下架)

项目介绍
结果展示

生物透射电镜(生物TEM)(已下架)

满意度: 100%

仪器型号:

日本-Leica UC7,Hitachi HT7700,日本-日立-生物透射电镜(日立HT7800),日本-日立-H7650,日立-H7650日本-日立-H7650生物TEM/莱卡EM UC-7超薄切等

预约次数:

1206次

服务周期:

平均21.0个工作日

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预约须知

1. 样品要求:包埋的细胞样品用1.5ml的尖底管,离心成团,固定液固定;负染的细胞、蛋白、外泌体等样品需要分散后保持低温寄送(负染样品不需要固定,尽量寄送新鲜样品);

2. 特别注意:是否需要包埋、切片或者负染;形貌拍摄由于其特殊性,老师会尽力拍摄,但无法保证一定会拍到您预期效果的图片,敬请理解!

3.不接收含有坚硬材料的样本,客户需对样品信息的真实性负责,若故意有所隐瞒,在测试过程中对设备造成损坏等一切后果将由您全部承担!

4. 提供10张拍摄照片(不提供分析服务),如需更多照片请提前与工作人员沟通确认,并且会产生额外费用,请悉知!如有其他疑问,请联系前期对接的技术顾问。


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结果展示


生物样品透射电镜取材注意事项


取材是电镜实验的第一步,其操作成功与否直接关系到电镜结果的效果及成败。为了得到好的结果,请务必按要求做好取材!取材基本要点:快(1min)、冷(4℃)、小(1 mm3)、净(无杂质)、准(部位准确)。不同的样品,取材细节上有很大区别!

(一)动物组织取材流程及要求

取材流程:动物麻醉或断头急性处死,解剖取出所需的器官或组织,生理盐水简单冲洗血液及组织液。按要求将组织切成1mm³左右小块,固定于组织及细胞电镜专用2.5%戊二醛固定液。

图片 1.png

取材要求:

1)位置:肝、肺、脾等无需定位组织取1mm³组织,3-5块;需要定位组织如骨骼肌、肾、肠、血管、胰岛等组织取材大小为0.5mm×1mm×3mm左右的长条状,且保证观察结构在组织块中。

2)操作:试剂、容器、器械提前4℃预冷;组织离体后,1min内浸入戊二醛固定液。取材时,可提前准备一个载玻片(硬卡纸),滴几滴戊二醛固定液,把标本浸在液滴中修整至合适大小(时间可稍长),用牙签挑出35粒标本,放入1.5ml尖头EP管。将修整好的标本块放入戊二醛固定液后,普通4℃冰箱保存。

(二)细胞取材流程及要求

取材流程:细胞直接刮下(不可胰酶消化,会造成细胞损伤),细胞悬液离心,弃上清,PBS2次(敏感的细胞直接固定,不洗),低速(1000-3000rpm)离心成团,加入组织及细胞电镜专用2.5%戊二醛固定液4℃过夜后快递。悬浮细胞、菌液可直接视为细胞悬浮液操作。固体培养基培养的菌可直接将菌落挑到PBS中,后续操作一致。

图片 2.png

取材要求:

1)细胞数量充足(6cm10cm皿长满),离心后在EP管中绿豆大小

2)缓冲液、戊二醛固定液等PH7.3-7.44℃提前预冷;

3)贴壁细胞连着培养基用细胞刮斜着快速刮下,不要反复来回刮;

4)细胞悬液转入离心管,1000-3000rpm离心成团,弃上清,加PBS,将细胞转入1.5mL尖头EP管,再次离心后弃上清。再加PBS重复上述步骤,最后加2.5%戊二醛固定,4℃保存。操作轻柔,尽量保证细胞不散开。(转速及时间请结合细胞情况,尽量低转速、短时间,以细胞离心成团为准!(PBS 清洗时间过长,易造成细胞损伤)

(三)植物组织取材及要求

取材流程:PBS冲洗样品,确保无泥沙等污染物。然后用锋利刀片或剪刀将样品切成合适大小,装入预冷的植物及细菌电镜专用2.5%戊二醛中。不需要定位的样品切成1立方毫米大小(如叶片、果实、花粉等),需要定位的样品,切成0.5mm×1mm×3mm的长条状(茎、根、表皮等)随后抽气,让组织能沉淀到管底。(简易抽气方法:将植物组织同固定液一起倒入注射器,用乳胶手套食指堵住注射器出口,右手拉动针栓,将注射器口垂直向上,松开食指,右手轻推针栓使液面上的气泡从注射器口排出,反复多次,直至组织沉入固定液。)

图片 3.png

(四)其他样品

悬浮细胞、细菌可视为细胞悬液操作。固体培养的细菌,可视为被切小的组织块,直接用牙签挑取3-5个菌落即可。外泌体、纳米材料、脂质体、病毒颗粒等负染样品,不需要固定,新鲜样本保持低温运送。

(五)样本储存运输标准:

储存:样本取材后,4℃保存时间不超过1个月。

运输:固定液充满EP管,封口膜封口,气泡膜或报纸包裹厚一些。最后泡沫盒+冰袋的方式运输,冰袋2-3个(-20℃冰袋,不要太多),一定要与样品隔开。特殊样品如脂肪、植物等用纱布将样品压到液面以下,保证充分固定。(见下图)

参考图:




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