激光共聚焦扫描显微镜

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激光共聚焦扫描显微镜

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仪器型号:

LEICA TCS SP8 激光共聚焦扫描显微镜,Olympus FV3000,Zeiss LSM 880,尼康Nikon C2 Plus激光共聚焦显微镜,徕卡710 / 奥林巴斯/尼康AXR(激光等

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585次

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平均7.6个工作日

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预约须知

1. 不同样本送样量或大小要求

    细胞:冻存的细胞或用25平方厘米培养瓶长到70%加满培养基室温固定好寄送;

    细菌:用20%甘油+80%菌液低温保存;直接拍摄需要封片后常温避光邮寄。

    液体类:根据测试时样本浓度和检测时间点而定,按照单次检测需要的3-5倍的量寄送;最好溶解在PBS(磷酸盐缓冲液)中;若采用稀释后样本测试,则须告知稀释倍数及工作液浓度;若溶剂为有机溶剂(如DMSO,醇类,酚类等),最高工作液浓度中,溶剂的占比低于0.5%。

    粉末类:可溶液粉末,注明溶剂的种类,当样品对溶剂有特殊需求时,请在送样时附加所需溶剂;能够溶于PBS/水/DMSO中;不可溶粉末:注明样本性质,灭菌方式,及分散为均匀悬浮液所需必要步骤

   块体:直接拍摄的样品长宽不超过20mm,高不超过15mm;或直径不超过10mm,厚度不超过5mm;膜最好500um以下,基底厚度没要求;需标出测试面。

2. 提供清楚激发/发射波长,拍摄倍数等要求信息;若需要染色,需要注明染色剂种类,标明染料名称和拍摄条件(激发/发射波长)

   备注:若做细胞摄取实验或其他亚细胞器的定位实验时,要求样品自带荧光。

3. 2D模式每样拍摄3个视野,3D模式每样拍摄1个视野,

4. 如有其他疑问,请联系前期对接的技术顾问。


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项目介绍

     激光共聚焦扫描显微镜以激光作为激发光源,采用光源针孔与检测孔共轭聚焦技术,每次只对空间上的一个点(焦点)进行成像,再通过计算机控制的一点一点的扫描形成标本的共焦图像。把X-Y平面(焦平面)扫描与Z轴(光轴)的扫描相结合,通过累加连续层次的二维图像,经过专门的计算机软件处理,可以获得样本的三维图像。在此过程中,来自焦点以外的光信号不会对图像形成干扰,从而大大提高了显微图象的清晰度和细节分辨能力。。

    激光共聚焦扫描显微镜既可以用于观察细胞形态,也可以用于细胞内生化成分的定量分析、光密度统计以及细胞形态的测量, 配合焦点稳定系统可以实现长时间活细胞动态观察。



样品要求

1. 不同样本送样量或大小要求

    细胞:冻存的细胞或用25平方厘米培养瓶长到70%加满培养基室温固定好寄送;

    细菌:用20%甘油+80%菌液低温保存;直接拍摄需要封片后常温避光邮寄。

    液体类:根据测试时样本浓度和检测时间点而定,按照单次检测需要的3-5倍的量寄送;最好溶解在PBS(磷酸盐缓冲液)中;若采用稀释后样本测试,则须告知稀释倍数及工作液浓度;若溶剂为有机溶剂(如DMSO,醇类,酚类等),最高工作液浓度中,溶剂的占比低于0.5%。

    粉末类:可溶液粉末,注明溶剂的种类,当样品对溶剂有特殊需求时,请在送样时附加所需溶剂;能够溶于PBS/水/DMSO中;不可溶粉末:注明样本性质,灭菌方式,及分散为均匀悬浮液所需必要步骤

   块体:直接拍摄的样品长宽不超过20mm,高不超过15mm;或直径不超过10mm,厚度不超过5mm;膜最好500um以下,基底厚度没要求;需标出测试面。

2. 提供清楚激发/发射波长,拍摄倍数等要求信息;若需要染色,需要注明染色剂种类,标明染料名称和拍摄条件(激发/发射波长)

3. 2D模式每样拍摄3个视野,3D模式每样拍摄1个视野


结果展示


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图1:粒体与荧光探针的共定位               图2:成骨细胞染色 

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图3:软骨细胞三维生长


常见问题
激光共聚焦拍照和普通荧光显微镜拍照有什么不同?

荧光显微镜使用的光源比激光共聚焦通能低,以短波长的紫外光为主,激光共聚焦是光源主要是激光,分辨率高,可以逐点扫描,可以做三维重构,适合多重染色的样品观察。


激光共聚焦荧光通道的颜色是实际颜色吗?

不是,是伪彩色,光电倍增管只检测强度信息,不检测颜色信息。颜色可以进行更改。不过可通过发射波长的范围,判断大概是什么颜色。


目前平台共聚焦有哪些激光器配置?

有405nm,488nm,552nm,555nm,559nm,635nm、650nm


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