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项目介绍
样品要求
结果展示
常见问题

1. 样品要求:
(1)可直接用于拍摄的片子(直接上机拍摄);
(2)原材料(需提供前处理方案+制片方法)。
2. 如有其他疑问,请联系前期对接的技术顾问。
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荧光显微镜(Fluorescence microscope) 是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成,利用一定波长的光源照射被检物体,使之发出荧光, 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光;另有一些物质本身虽不能发荧光,但如果用荧光染料或荧光抗体染色后,经紫外线照射亦可发荧光,荧光显微镜就是对这类物质进行定性和定量研究的工具之一。

1. 不同样本送样量或大小要求
细胞:冻存的细胞或用25平方厘米培养瓶长到70%加满培养基室温固定好寄送;
细菌:用20%甘油+80%菌液低温保存;直接拍摄需要封片后常温避光邮寄。
液体类:根据测试时样本浓度和检测时间点而定,按照单次检测需要的3-5倍的量寄送;最好溶解在PBS(磷酸盐缓冲液)中;若采用稀释后样本测试,则须告知稀释倍数及工作液浓度;若溶剂为有机溶剂(如DMSO,醇类,酚类等),最高工作液浓度中,溶剂的占比低于0.5%。
粉末类:可溶液粉末,注明溶剂的种类,当样品对溶剂有特殊需求时,请在送样时附加所需溶剂;能够溶于PBS/水/DMSO中;不可溶粉末:注明样本性质,灭菌方式,及分散为均匀悬浮液所需必要步骤
块体:直接拍摄的样品长宽不超过20mm,或直径不超过10mm,厚度不超过5mm;膜最好500um以下,基底厚度没要求;需标出测试面。
2. 提供清楚激发/发射波长,拍摄倍数等要求信息;若需要染色,需要注明染色剂种类,标明染料名称和拍摄条件(激发/发射波长)

图1:live/dead染色 图2:免疫荧光


共聚焦用激光作为光源,光电倍增管做检测器,逐点扫描,对应每个像素其能量比较高;汞灯虽然总功率高,但属于场照明,对应每个像素的能量并没有激光高。激光共聚焦有针孔,可以排除焦平面上焦点以外及非焦平面杂散光的影响,因为空间分辨率提高,但因为是每个像素每个像素逐点扫描,采集较慢,一张图并不是同一时间采集的,时间分辨高不高;CCD拍照取的是样本的同一时间。

400-005-5990