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qPCR

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qPCR须知:

1.简介

  在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。分为SYBRGreen法与TaqMan探针法。

  荧光染料法:实验设计简单(仅需2个引物,无需设计探针),初始成本低,灵敏度高,但需要进行熔解曲线分析检验扩增反应的特异性。适用于非特异性检测(专一性要求不高或高通量检测)。探针法:有高特异性(引物和探针共同于模板结合),高信噪比,能进行多重反应。但成本高,实验设计繁琐。适用于扩增序列专一检测。

2.服务流程

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3. 送样须知

 ⑴细胞、细菌、真菌、动植物组织等均可寄送,为了保证实验要求,样品数尽可能准备充足。

 ⑵若样品为纯细胞或细菌样,离心后获得沉淀黄豆大小为宜,若样品为水样等未知菌量样本,需要提供至少1L的水样或寄送装有过滤定量水样的滤膜(4°C),干燥寄送,如果其他样品寄送需求,请与工作人员沟通确认!

 ⑶待测样品为RNA样品及cDNA样本,接收后需先进行质检,质检合格的开展后续项目。

 ⑷不接受具有致病性的样品。

 ⑸待测样品(原始样品或者RNA或者cDNA,原始样品可由我们代处理,RNA样品及cDNA样本接收后需先进行质检,质检合格的开展后续项目);

 ⑹提供所需的引物/标准品(或平台代设计及合成);提供检测基因的序列和引物序列,若基因序列来自文献等其他途径,可以多参考几组,避免引物特异性不足,延长实验周期。

 ⑺其他所涉及的细胞、试剂盒以及生物耗材等平台都可以有偿提供

4.交付内容:

  实验报告(包括仪器设备厂家型号、试剂品牌货号、实验报告、引物信息、试剂仪器信息及扩增曲线、溶解曲线、数据分析结果等),原始数据。

5.试验周期

  收到样品后1-2周,具体试验周期与工作人员沟通。


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