HE染色一e测试

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HE染色

满意度： 98%

仪器型号：

包埋切片，标本包埋切片染色，生物方案定制，迈瑞兽用全自动血液细胞分析仪型号：BC-30Vet等

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139次

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平均5-20个工作日

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HE染色

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项目介绍

苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ，简称HE染色法，石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。

脱氧核糖核酸（DNA）两条链上的磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。伊红Y是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明对比。伊红是细胞浆的良好染料。

由于组织或细胞的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。经苏木精染色后，细胞核及钙盐粘液等呈蓝色，可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝，如处理适宜，可使细胞核着清楚的深蓝色，胞浆等其它成分脱色。再利用胞浆染料伊红染胞浆，使胞浆的各种不同成分又呈现出深浅不同的粉红色。故各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。

细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色，软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色，粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色，胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色，弹力纤维呈亮粉红色，红血球呈橘红色，蛋白性液体呈粉红色。

着色情况与组织或细胞的种类有关，也随其生活周期及病理变化而改变。例如，细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时，伊红着色由浅变深。

H-E染色评定标准：

（1）切片完整，厚度4-6微米，厚薄均匀，无皱褶无刀痕；

（2）染色核浆分明，红蓝适度，透明洁净，封裱美观。

样品要求

1.动物组织：处死动物后立即取材，生理盐水冲洗表面，4%的多聚甲醛固定，一般组织固定48h左右进行包埋最好（尽量不要固定过久），大小不超过1cm*1cm*0.5cm，装组织的管子一定要比组织大（避免挤压影响组织形态），固定液是样品体积的5倍以上，以保证充分固定，封口膜封好避免运输过程中固定液洒出。

2.植物组织：新鲜取材后固定于FAA固定液中，大小不超过1cm*1cm*0.5cm，如果组织悬浮于固定液上，可以抽真空使其下沉。

结果展示

2.5.4-肺组织脑组织HE染色.png

常见问题

细胞核染色暗淡，即苏木精染色太淡

原因:（1）切片在苏木精染色液停留时间太短；（2）苏木精染色液过度氧化，失去染色能力，不能再继续使用；（3）分化步骤处理时间过长。如果是骨组织细胞核暗淡，则多数是由于脱钙过度造成。

对策：切片重新染色。如果组织在固定液固定时间过长，细胞核染色能力将减弱，须增加其在苏木精染色液的时间，或用一些方法增加组织的嗜碱性，以改善细胞核的着色。

细胞核呈红、棕色改变

原因：苏木精染色液过度氧化和切片在苏木精染液染色后返蓝不足。

对策：首先，每次染色之前检查苏木精染色液的染色能力，发现氧化过度应及时更换。其次，可用流水、温水或弱碱性溶液如稀氨水、0. 2%碳酸氢钠等，在苏木精染色后，给切片以足够的蓝化时间。

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