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常见问题

TUNEL

满意度: 98%

仪器型号:

匈牙利-3DHISTECH-Pannoramic MIDI,TUNEL

匈牙利-3DHISTECH-Pannoramic MIDI,TUNEL

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80次

服务周期:

平均10.7-16.5个工作日

项目推荐

HE染色/特殊染色

已下单1265| 满意度98%

平均周期17.0个工作日

HE染色/特殊染色

病理形态学检查方法指:先用肉眼观察大体病理标本的病变,然后切取一定大小的病变组织,用病理组织学方法制成病理切片,用显微镜进一步检查病变。一般有HE染色、免疫组化、免疫荧光、Masson染色等。1、HE染色HE染色即苏木精-伊红染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。2、Masson染色masson染色是指用两种或三种阴离子染料混合,胶原纤维呈蓝色,肌纤维呈红色。用来显示组织中纤维以及炎性因子的染色方法之一。

免疫组化/免疫荧光

已下单402| 满意度98%

平均周期20.0个工作日

免疫组化/免疫荧光

1、免疫组化是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术( immunohistochemistry,IHC)。2、免疫荧光免疫荧光技术是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。它是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光基团,再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。

HE染色(钜惠套餐)

已下单591| 满意度99%

平均周期10.0个工作日

HE染色(钜惠套餐)

HE染色HE染色即苏木精-伊红染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。

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X射线光电子能谱(XPS)

优惠价 ¥54.00 ¥90.00起

平均周期5.0个工作日

X射线光电子能谱(XPS)

1. X射线光电子能谱(XPS)可测试全谱、精细谱、俄歇谱、价带谱,也可刻蚀后采谱得到深层的信息;2. X射线光电子能谱(XPS)按元素个数收费(需要包含必测元素C,不能测试H、He元素);一个元素默认测一个轨道,若测试多个轨道计为多个元素;一个样品默认一个测试位置,若测试多个位置计为多个位置;3. XPS定量为半定量数据。原子百分含量小于5%的元素可能测不出明显信号;4. 测试默认单色化Al靶(AlKαsource),能量1486.68eV;

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样品要求

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常见问题

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细胞-Tunel染色送样要求:客户可根据实验需要选择增值服务,如细胞培养、样品处理等。

Tunel染色+荧光拍照标本要求:

1. 对于贴壁细胞或细胞涂片,PBS洗涤3次,用4%多聚甲醛固定细胞30-60分钟,低温寄送(冰袋邮寄,防止结冰);

2. 对于悬浮细胞或细胞悬液,收集细胞(不超过200万细胞),PBS洗涤3次,用4%多聚甲醛固定细胞30-60分钟,为防止细胞聚集成团,宜在侧摆摇床或水平摇床上缓慢摇动的同时进行固定。


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项目介绍

Tunel染色   

TUNEL凋亡染色作用原理为染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量3'-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端,从而可进行凋亡细胞的检测。适用于组织样本(石蜡包埋、冰冻切片)和细胞样本在单细胞水平上的凋亡原位检测、抗肿瘤药的药效评价。


样品要求

细胞-Tunel染色送样要求:客户可根据实验需要选择增值服务,如细胞培养、样品处理等。

Tunel染色+荧光拍照标本要求:

1. 对于贴壁细胞或细胞涂片,PBS洗涤3次,用4%多聚甲醛固定细胞30-60分钟,低温寄送(冰袋邮寄,防止结冰);

2. 对于悬浮细胞或细胞悬液,收集细胞(不超过200万细胞),PBS洗涤3次,用4%多聚甲醛固定细胞30-60分钟,为防止细胞聚集成团,宜在侧摆摇床或水平摇床上缓慢摇动的同时进行固定。


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1、组织tunel白光

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2、组织tunel荧光

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3、细胞tunel荧光

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常见问题
荧光信号弱或没有荧光信号

原因1:样本处理不当

        1)样本切片太厚。建议适当将切片切薄一点,便于染色。

        2)脱蜡和水化不充分。建议脱蜡先60 ºC 20 min,再使用二甲苯两次5-10 min;而水化用梯度乙醇从高到低浓度浸洗。

        3Proteinase K的孵育时间过短。优化Proteinase K的孵育时间,常用时间10-30 minμm左右的片子孵育10 min30μm左右的片子孵育30 min

        4Proteinase K浓度过低。建议蛋白酶K一般工作液浓度为20 μg/mL

        5)放置在-20 ºC保存较长时间的切片不新鲜,减低染色效率。建议使用新鲜切片。

原因2:染色操作不当

        1染色时间过短。建议一般 37 ºC 孵育60 min,可以根据凋亡损伤程度,可长至2 h,但要结合背景着色。

        2TdT酶或荧光素/酶标记的dUTP浓度过低。建议适当提高TdT酶或荧光素/酶标记的dUTP浓度。

        3TdT酶失活。建议TUNEL反应液临用前配制,短时间在冰上保存。不宜长期保存,长期保存会导致TdT酶失活。

        4样本干燥。加上TUNEL反应液后,请盖上盖玻片/保鲜膜/湿盒中进行,保证样本均匀染色,又可防止反应液干燥。



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