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负染色技术

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负染色技术

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仪器型号:
日本-JEOL-JEM1230,日本-Leica UC7,Hitachi HT7700,日本-日立-H7650,日本-日立-Hitachi HT7700,日本-日立-生物透射电镜(日立HT7800),日立HT7800等
预约次数:
144次
服务周期:
平均5-10个工作日
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常见问题
论文致谢
预约须知

1.样品要求:

  a:液体样品提供至少100μl,并配置好合适的浓度(上机前直接滴加样品,不做稀释或浓缩);

  b:粉末样品30mg左右,并注明溶剂类型及配置比例;

2.运输要求:

  干冰运输,并附详细送检要求的送样单。

3.交付内容和周期:

 (1)提供8张图片;

 (2)测试周期为收到样品后的1-2周左右,具体送样时间及实验周期请与工作人员沟通确认。

注意:负染色的效果可能受到样本制备及运输时间影响,如需负染色,关于样本准备和测试安排,请提前沟通。


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项目介绍

      负染色技术是一种制备电子显微镜样品图像呈现复反差的技术。用于观察样品中的颗粒性物质或生物大分子。用金属盐对铺展在载网上的样品进行染色,使整个载网都铺上一层重金属盐,而有凸出颗粒的地方则没有染料沉积。染色后,在电镜下观察时,被观察的对象为亮的,背景为暗的。负染色是只染背景而不染样品,与光学显微镜样品的染色正好相反。目前最常用的负染液是醋酸铀或者磷钨酸

样品要求

 1.送样要求:

(1)液体样品提供至少100μl,并配置好合适的浓度(上机前直接滴加样品,不做稀释或浓缩);

(2)粉末样品30mg左右,并注明溶剂类型及配置比例;

(3)外泌体样品100μL,干冰运输寄送(不少于15kg干冰);

(4)病毒要灭活后寄送,4℃运输寄送;

(5)细菌样品,4℃运输寄送。

  2.样品注意运输方式,需要冰袋或者干冰运输的请提前说明,并附详细送检要求的预约单和送样单。

    负染色的效果可能受到样本的运输时间影响,如需负染色,关于样本准备和测试安排,请提前沟通。




结果展示

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 图1. 负染色制样后观察到细胞培养提取的外泌体

常见问题
外泌体、蛋白等负染样本应该如何准备?

 ①样品悬液尽量纯化。如果杂质太多,如大量的细胞碎片,培养基残渣,糖类以及各种盐类结晶的存在都会干扰染色反应和电镜的观察。尤其是不能有过多的糖类,因为在电子束的轰击下,糖类容易碳化而有碍观察,因此样品要适当提纯。

 ②液体样品提供100-200μl,提供合适的浓度(上机前直接滴加样品,不做稀释或浓缩);粉末样品20mg左右,并告知配置比例。样品悬液的浓度要适中,太稀在电镜下很难找到样品,太浓样品堆积影响观察

 ③根据样品的保存条件,常温保存可直接寄送;4℃保存可以加2-3个冰袋寄送,冰袋一定不要直接接触样品管,用泡沫包裹样品,避免样品结冰,注意冰袋融化不要弄湿预约单、样品管上编号,编号需要按照送样单上的编号,尽量简化编号。

    如果是外泌体样品,尽量是新鲜提取的样本(不能固定),加干冰寄送,干冰消耗量以每天7kg/d计算,保证足够量的干冰。



预约须知

须知:

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