生物透射电镜（生物TEM）
生物透射电镜（生物TEM）须知：
1. 样品要求：包埋的细胞样品用1.5ml的尖底管，离心成团，固定液固定；负染的细胞、蛋白、外泌体等样品需要分散后保持低温寄送（负染样品不需要固定，尽量寄送新鲜样品）；
2. 特别注意：是否需要包埋、切片或者负染；形貌拍摄由于其特殊性，老师会尽力拍摄，但无法保证一定会拍到您预期效果的图片，敬请理解！
3.不接收含有坚硬材料的样本，客户需对样品信息的真实性负责，若故意有所隐瞒，在测试过程中对设备造成损坏等一切后果将由您全部承担！
4. 如有其他疑问，请联系前期对接的技术顾问。
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结果展示
生物样品透射电镜取材注意事项
取材是电镜实验的第一步，其操作成功与否直接关系到电镜结果的效果及成败。为了得到好的结果，请务必按要求做好取材！取材基本要点：快（1min）、冷（4℃）、小（1 mm3）、净（无杂质）、准（部位准确）。不同的样品，取材细节上有很大区别！
（一）动物组织取材流程及要求
取材流程：动物麻醉或断头急性处死，解剖取出所需的器官或组织，生理盐水简单冲洗血液及组织液。按要求将组织切成1mm³左右小块，固定于组织及细胞电镜专用2.5%戊二醛固定液。
取材要求：
（1）位置：肝、肺、脾等无需定位组织取1mm³组织，3-5块；需要定位组织如骨骼肌、肾、肠、血管、胰岛等组织取材大小为0.5mm×1mm×3mm左右的长条状，且保证观察结构在组织块中。
（2）操作：试剂、容器、器械提前4℃预冷；组织离体后，1min内浸入戊二醛固定液。取材时，可提前准备一个载玻片（硬卡纸），滴几滴戊二醛固定液，把标本浸在液滴中修整至合适大小（时间可稍长），用牙签挑出3～5粒标本，放入1.5ml尖头EP管。将修整好的标本块放入戊二醛固定液后，普通4℃冰箱保存。
（二）细胞取材流程及要求
取材流程：细胞直接刮下（不可胰酶消化，会造成细胞损伤），细胞悬液离心，弃上清，PBS洗2次（敏感的细胞直接固定，不洗），低速（1000-3000rpm）离心成团，加入组织及细胞电镜专用2.5%戊二醛固定液4℃过夜后快递。悬浮细胞、菌液可直接视为细胞悬浮液操作。固体培养基培养的菌可直接将菌落挑到PBS中，后续操作一致。
取材要求：
（1）细胞数量充足（6cm或10cm皿长满），离心后在EP管中绿豆大小；
（2）缓冲液、戊二醛固定液等PH值7.3-7.4，4℃提前预冷；
（3）贴壁细胞连着培养基用细胞刮斜着快速刮下，不要反复来回刮；
（4）细胞悬液转入离心管，1000-3000rpm离心成团，弃上清，加PBS，将细胞转入1.5mL尖头EP管，再次离心后弃上清。再加PBS重复上述步骤，最后加2.5%戊二醛固定，4℃保存。操作轻柔，尽量保证细胞不散开。(转速及时间请结合细胞情况，尽量低转速、短时间，以细胞离心成团为准！（PBS 清洗时间过长，易造成细胞损伤)；
（三）植物组织取材及要求
取材流程：PBS冲洗样品，确保无泥沙等污染物。然后用锋利刀片或剪刀将样品切成合适大小，装入预冷的植物及细菌电镜专用2.5%戊二醛中。不需要定位的样品切成1立方毫米大小（如叶片、果实、花粉等），需要定位的样品，切成0.5mm×1mm×3mm的长条状（茎、根、表皮等）随后抽气，让组织能沉淀到管底。（简易抽气方法：将植物组织同固定液一起倒入注射器，用乳胶手套食指堵住注射器出口，右手拉动针栓，将注射器口垂直向上，松开食指，右手轻推针栓使液面上的气泡从注射器口排出，反复多次，直至组织沉入固定液。）
（四）其他样品
悬浮细胞、细菌可视为细胞悬液操作。固体培养的细菌，可视为被切小的组织块，直接用牙签挑取3-5个菌落即可。外泌体、纳米材料、脂质体、病毒颗粒等负染样品，不需要固定，新鲜样本保持低温运送。
（五）样本储存运输标准：
储存：样本取材后，4℃保存时间不超过1个月。
运输：固定液充满EP管，封口膜封口，气泡膜或报纸包裹厚一些。最后泡沫盒+冰袋的方式运输，冰袋2-3个（-20℃冰袋，不要太多），一定要与样品隔开。特殊样品如脂肪、植物等用纱布将样品压到液面以下，保证充分固定。（见下图）
参考图：
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