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蛋白组转录组,蛋白的原核表达与纯化,蛋白方案定制

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蛋白含量测试

已下单314| 满意度97%

平均周期11.0个工作日

蛋白含量测试

蛋白含量的测定是生物化学、分子生物学、临床医学以及食品科学等多个领域中不可或缺的基本实验步骤。准确测量蛋白质浓度对于保证下游实验如Western Blot、ELISA、免疫沉淀等实验结果的可靠性至关重要。测试方法1、Bradford法(考马斯亮蓝):Bradford法基于蛋白质与考马斯亮蓝G-250染料在特定条件下形成稳定的复合物,其最大吸收峰会发生显著变化,通过分光光度计测定吸光值的变化即可计算出蛋白质浓度。(1)实验准备准备不同已知浓度的标准蛋白溶液以绘制标准曲线。配制Bradford试剂(市售即用型或按厂家说明配制)。(2)操作步骤取若干微孔板,每孔加入一定量待测蛋白样品及一系列标准蛋白溶液。向各孔加入等体积的Bradford试剂,混匀后室温静置一段时间(通常为5-10分钟)。使用分光光度计在595nm波长下测定各孔的吸光值。以标准蛋白浓度为横坐标,对应的吸光值为纵坐标,绘制标准曲线。2、BCA法:基于双缩脲原理,碱性条件下蛋白质将Cu2+还原成Cu+,BCA鳌合Cu+作为显色剂,产生蓝紫色并在562nm有吸收峰,单价Cu+与蛋白质呈剂量相关性。可以根据待测蛋白在562nm处的吸光度计算待测蛋白浓度。(1)实验准备a. 取0.8ml蛋白标准配制液加入到一管蛋白标准(20mg BSA)中,充分溶解后配制成25mg/ml的蛋白标准溶液。配制后可立即使用,也可以-20ºC长期保存。b. 取适量25mg/ml蛋白标准液,稀释至终浓度为0.5mg/ml。例如取20µl 25mg/ml蛋白标准,加入980µl稀释液即可配制成 0.5mg/ml蛋白标准。蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,也可以用0.9% NaCl或PBS 稀释标准品。稀释后的0.5mg/ml蛋白标准可以-20ºC长期保存。(2)操作步骤a. 将标准品按0、1、2、4、8、12、16、20µl加到96孔板的标准品孔中,加标准品稀释液补足到20µl,相当于标准品浓度分 别为0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/ml。b. 加适当体积样品到96孔板的样品孔中。如果样品不足20µl,需加标准品稀释液补足到20µl。请注意记录样品体积。c. 各孔加入200µl BCA工作液,37ºC放置20-30分钟。 注: 也可以室温放置2小时,或60ºC放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时,颜色会随着时间的延长不断加深。并且显色反 应会因温度升高而加快。如果浓度较低,适合在较高温度孵育,或适当延长孵育时间。d. 用酶标仪测定A562,或540-595nm之间的其他波长的吸光度。e. 根据标准曲线和使用的样品体积计算出样品的蛋白浓度。3、凯氏定氮法    它是通过测定样品中的总氮含量间接反映蛋白质总量的一种方法,因为蛋白质含氮量相对恒定(约16%)。当样本与浓硫酸共热,蛋白氮转化为铵盐,在强践行条件下将氨整出,用加有指示剂的硼酸吸收,最后用标准酸滴定硼酸,通过标准酸的用量即可求出蛋白质中的含氮量和蛋白质含量。总结来说,不同的蛋白含量测定方法各有优劣,选择合适的方法取决于实验需求、灵敏度要求以及可能存在的干扰因素。

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X射线光电子能谱(XPS)

优惠价 ¥54.00 ¥90.00起

平均周期5.0个工作日

X射线光电子能谱(XPS)

1. X射线光电子能谱(XPS)可测试全谱、精细谱、俄歇谱、价带谱,也可刻蚀后采谱得到深层的信息;2. X射线光电子能谱(XPS)按元素个数收费(需要包含必测元素C,不能测试H、He元素);一个元素默认测一个轨道,若测试多个轨道计为多个元素;一个样品默认一个测试位置,若测试多个位置计为多个位置;3. XPS定量为半定量数据。原子百分含量小于5%的元素可能测不出明显信号;4. 测试默认单色化Al靶(AlKαsource),能量1486.68eV;

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X射线多晶衍射(XRD)

优惠价 ¥24.00 ¥40.00起

平均周期4.5个工作日

X射线多晶衍射(XRD)

当一束单色X射线入射到晶体时,由于晶体是由原子规则排列成的晶胞组成,这些规则排列的原子间距离与入射X射线波长有X射线衍射分析相同数量级,故由不同原子散射的X射线相互干涉,在某些特殊方向上产生强X射线衍射,衍射线在空间分布的方位和强度,与晶体结构密切相关,每种晶体所产生的衍射花样都反映出该晶体内部的原子分配规律。这就是X射线衍射的基本原理。

350/h起

云现场/现场-场发射扫描电镜(SEM)

已下单45482| 满意度100%

平均周期6.5个工作日

云现场/现场-场发射扫描电镜(SEM)

    扫描电子显微镜(SEM)是一种介于透射电子显微镜和光学显微镜之间的一种观察手段。其利用聚焦很窄的高能电子束来扫描样品,通过光束与物质间的相互作用,来激发各种物理信息,对这些信息收集、放大、再成像以达到对物质微观形貌表征的目的。此外,扫描电子显微镜和其他分析仪器相结合,可以做到观察微观形貌的同时进行物质微区成分分析。

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蛋白免疫方案定制

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