一文读懂：纳米颗粒跟踪分析技术（NTA）一e测试

推荐使用微信扫码登录/注册

使用微信扫码，一键绑定微信，可更快速更及时
更方便的获得订单相关信息与优惠活动

一文读懂：纳米颗粒跟踪分析技术（NTA）

2023-03-14 15:36:26 0 1512

纳米颗粒跟踪分析技术（Nanoparticle Tracking Analysis，NTA）是利用光散射和布朗运动的特性获得液体悬浮液中的样本粒度分布的检测方法。它能对悬浮液中粒径分布范围较宽的颗粒进行全方位表征，具有分辨率高、检测速度快、准确度高等优点。

技术原理

纳米颗粒在其悬浊液中受到周边溶液分子的撞击而做无规则的布朗运动，将一束能量集中的激光穿过玻璃棱镜，对样品（悬浮颗粒的溶液）进行照射，激光光束从较小角度入射进入样品溶液，照亮溶液中的颗粒。检测中通过光学显微镜，收集纳米颗粒的散射光信号，观察粒子并跟踪其布朗运动轨迹。

图1:纳米颗粒受到溶液分子撞击做无规则的布朗运动

对做布朗运动的纳米颗粒进行追踪分析，通过二维 Stokes-Einstein方程计算颗粒流体力学半径。

图2:Stokes-Einstein方程

技术特点

自动聚焦：测试过程中自动聚焦，无需人工干预，保证测试结果的准确性。

准确度高：可以对每一个纳米颗粒进行追踪，测试结果更加准确，更加稳定。

应用领域

对复杂的样品具有极高的分辨率，特别适合外泌体、蛋白质聚集、药物传输、纳米颗粒毒理、病毒和疫苗等复杂体系相关研究，还可利用荧光标定特定颗粒，利用NTA技术单独对这些颗粒检测，而不受到复杂环境的影响。

应用举例

1.检测生牛乳中外泌体粒径范围

采用300μL的1×PBS进行重悬外泌体，得到外泌体重悬液，然后打开仪器及电脑软件，向外泌体重悬液加入10mL 1×PBS溶液，得到二次稀释液，进行样品测试前，用纯水冲洗样品池，然后把样品打入样品池，上机观察。

图3:生牛乳外泌体粒径分布

生牛乳的外泌体粒径范围在70-300 nm，超出了正常外泌体地30-150 nm粒径范围。原因可能使因为生牛乳中含有较多微生物，微生物可以吸附外泌体，使外泌体出现团聚现象。

2.前列腺癌外泌体粒径分布研究

采用动态光散射方法检测，对外泌体粒径分布进行研究，将收集的外泌体稀释成颗粒浓度为 10¹⁰ L^-1的密度，0.22 μｍ微孔滤膜过滤后，将其注入Nanosight纳米颗粒跟踪分析仪进行分析。

图4:前列腺癌外泌体粒径分析

提取的外泌体用 PBS缓冲液稀释了40倍上所检测颗粒的浓度（10¹⁰ L^-1 ），图片显示单峰且曲线流畅，无多余杂峰，粒径峰值134 nm。总体来说粒径为0-200nm的占比>80%，平均粒径为（163.3±51）nm 有些许粒径较大的颗粒可能与颗粒之间的黏附有关。

参考文献

1.尚鹏远,曹业东,李和平等.不同灭菌方式对商品乳外泌体完整性的影响[J].中国乳品工业,2022,50(7):25-27.

2.吕立国,吴巧玲,黄娟等.含蜂毒肽的前列腺癌外泌体制备及体外评价[J].中国药理学通报,2023,39(2):392-398.

本文为e测试综合整理，未经允许，禁止转载！