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首页 测试百科 激光共聚焦显微镜应用(二)

激光共聚焦显微镜应用(二)

激光共聚焦显微镜 CLSM 图像分析 三维重建


01
激光共聚焦显微镜原理及构造

02
在钢铁材料中的应用研究
激光共聚焦显微镜在冶金领域主要研究材料在熔融及凝固时夹杂物的聚集、长大以及夹杂物的复合化过程等方面;材料领域主要用其研究相变起始温度、孕育期、相变类型、形貌、融化、晶粒长大、第二相溶解等方面;焊接领域主要集中在研究夹杂物对针状铁素体相变的影响。常温观察主要用于材料表面粗糙度、斜面与表面的夹角、二维及三维形貌表征,用于对材料相变及断裂机理表征。
 图. 高温激光共聚焦观察耐磨钢冷却过程中形成的δ相
 图. 低碳钢中在冷却过程中发生的铁素体相变((a)648 ℃;(b)600 ℃。)
图. 耐磨钢升温过程中晶粒长大行为((a)1 375 ℃;(b)1 450 ℃。)
03
生物领域的应用研究
绿色荧光融合蛋白质微米环形貌

利用激光共聚焦显微镜表征微米环形貌,计算单峰状态和聚集状态的分子量。对蛋白质微米环形貌进一步研究。激光共聚焦显微镜是在荧光显微镜成像的基础上,使用可见光激发荧光探针,并利用计算机进行图像处理,实现断层扫描成像,得到蛋白质微米环形貌的荧光图像,进而分析蛋白质微米环的空间结构,确保序列特征描述得清晰完整。
 图. 激光共聚焦显微镜下的微米环
 图. 融合蛋白质荧光微米环
蛋白微球的结构及药物分析

在郭喆霏等人的研究中激光共聚焦显微镜( CLSM )表征蛋白微球,获得微球内部药物分布及结构信息,运用 CLSM 对载异硫氰酸荧光素牛血清白蛋白(FITC-BSA)的微球扫描成像,进行图像分析和三维重建;并通过 CLSM 考察载BSA微球对异硫氰酸荧光素( FITC )的摄取,研究微球突释。结果表明CLSM 实现微球内部药物分布的可视化及其三维重构,并检测药物分布均匀性。
微球的激光共聚焦显微镜图
 
图. DL-PLPCL 微球的 CLSM 三维重构图
 
图. 微球中的药物分布(微球 A 、B 、C和 D ;从左至右:荧光强度曲面图、CLSM 图和 CLSM 三维重构图)
 
图. 微球摄取试验(从上至下:微球 A 、 B 、 C 和 D ;从左至右:荧光强度曲面图、 CLSM 图和 CLSM 三维重构图)
参考文献:
[1]王昌,王辉,张超,李继康,张淑兰.高温激光共聚焦显微镜在钢铁材料中研究进展[J].物理测试,2019,37(06):15-26.
[2]胡坤.基于激光共聚焦显微镜的绿色荧光融合蛋白质微米环形貌分析[J].通化师范学院学报,2020,41(12):45-51.

[3]郭喆霏,成晓岚,罗宇燕,黄小舟,张永明.激光共聚焦显微镜分析载蛋白微球的结构及药物分布[J].中国医院药学杂志,2015,35(15):1381-1384.

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