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生物组织切片

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生物组织切片

满意度: 98%

仪器型号:

美国-Thermo Fisher-HM525 NX,德国-Leica-RM2016

美国-Thermo Fisher-HM525 NX,德国-Leica-RM2016

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项目推荐

X射线光电子能谱(XPS)

已下单202035| 满意度100%

平均周期5.0个工作日

X射线光电子能谱(XPS)

1. X射线光电子能谱(XPS)可测试全谱、精细谱、俄歇谱、价带谱,也可刻蚀后采谱得到深层的信息;2. X射线光电子能谱(XPS)按元素个数收费(需要包含必测元素C,不能测试H、He元素);一个元素默认测一个轨道,若测试多个轨道计为多个元素;一个样品默认一个测试位置,若测试多个位置计为多个位置;3. XPS定量为半定量数据。原子百分含量小于5%的元素可能测不出明显信号;4. 测试默认单色化Al靶(AlKαsource),能量1486.68eV;

X射线多晶衍射(XRD)

已下单156564| 满意度99%

平均周期4.5个工作日

X射线多晶衍射(XRD)

当一束单色X射线入射到晶体时,由于晶体是由原子规则排列成的晶胞组成,这些规则排列的原子间距离与入射X射线波长有X射线衍射分析相同数量级,故由不同原子散射的X射线相互干涉,在某些特殊方向上产生强X射线衍射,衍射线在空间分布的方位和强度,与晶体结构密切相关,每种晶体所产生的衍射花样都反映出该晶体内部的原子分配规律。这就是X射线衍射的基本原理。

350/h起

SEM云现场/现场

已下单70464| 满意度100%

平均周期6.5个工作日

SEM云现场/现场

    扫描电子显微镜(SEM)是一种介于透射电子显微镜和光学显微镜之间的一种观察手段。其利用聚焦很窄的高能电子束来扫描样品,通过光束与物质间的相互作用,来激发各种物理信息,对这些信息收集、放大、再成像以达到对物质微观形貌表征的目的。此外,扫描电子显微镜和其他分析仪器相结合,可以做到观察微观形貌的同时进行物质微区成分分析。

场发射扫描电镜(SEM)

已下单135102| 满意度99%

平均周期5.0个工作日

场发射扫描电镜(SEM)

扫描电子显微镜(SEM)是一种介于透射电子显微镜和光学显微镜之间的观察手段。其利用聚焦很窄的高能电子束来扫描样品,通过光束与物质间的相互作用,来激发各种物理信息,对这些信息进行收集、放大、再成像,以达到对物质微观形貌表征的目的。此外,扫描电子显微镜和其他分析仪器相结合,可以做到观察微观形貌的同时进行物质微区成分分析。

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1、HE染色项目

(1)需要告知包埋要求(横切/纵切/切最大面);拍摄要求:倍数、视野、张数等信息

(2)如提供固定好的组织/冰冻组织,则选择包埋+切片+染色类型(如常规染色/TUNEL染色/免疫组化/免疫荧光等);


2、免疫组化和免疫荧光项目

(1)需要确认样本物种、组织部位、样本状态、样本量及需要做的实验项目;

(2)有些组织,如脑,需要确认切面要求;

(3)若选择普通荧光拍照或共聚焦拍照,需确认拍照的部位, 并提供参考图;需要确认拍照倍数;一般默认不提供明场照片,若需要,需在预约单里备注;

(4)确认是否提供适用于免疫荧光/组化实验的抗体,若提供,需提供10μL及说明书,且需注意免疫荧光双标一抗种属来源需不一致;若不提供,可使用公司抗体库内抗体,使用费咨询工作人员;若需购买,可由公司代购,使用完毕后可寄回;

(5)不提供免疫荧光图片分析。


  



  

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项目介绍

病理形态学检查方法指:先用肉眼观察大体病理标本的病变,然后切取一定大小的病变组织,用病理组织学方法制成病理切片,用显微镜进一步检查病变。一般有HE染色、免疫组化、免疫荧光、Masson染色等。

1、HE染色

HE染色即苏木精-伊红染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。

2、Masson染色

masson染色是指用两种或三种阴离子染料混合,胶原纤维呈蓝色,肌纤维呈红色。用来显示组织中纤维以及炎性因子的染色方法之一。

3、免疫组化

是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术( immunohistochemistry,IHC)。

4、免疫荧光

免疫荧光技术是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。它是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光基团,再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。



样品要求

HE染色/特殊染色送样要求:

  1. 包埋:石蜡包埋、OTC包埋。

  2. 标本要求:已固定在4%多聚甲醛中的动物组织;新鲜冻存组织;或已固定在FAA中的植物组织。

  3. 送样要求:

    a. 动物组织:处死动物后立即取材,生理盐水冲洗表面,4%的多聚甲醛固定,一般组织固定48h左右进行包埋最好,大小不超过1cm*1cm*0.5cm,装组织的管子一定要比组织大,固定液是样品体积的5倍以上,以保证充分固定,封口膜封好避免运输过程中固定液洒出。新鲜冻存组织需干冰运输。

    b. 植物组织:新鲜取材后固定于FAA固定液中,大小不超过1cm*1cm*0.5cm,如果组织悬浮于固定液上,可以抽真空使其下沉。

    注:常温或少量冰袋运输。

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    结果展示

    1、HE染色



    2、Masson染色





    3、甲苯安蓝染色


    4、番红固绿染色



    5、油红 o 染色



    6、pas 染色



    7、AB-PAS染色



    8、天狼猩红




    9、免疫组化



    10、免疫荧光:

    (图片依次为免疫荧光单标、双标、三标、四标


     

     





    常见问题
    产生组织切片非特异性染色的原因

    抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加背景着色。这可通过缩短一抗/二抗孵育时间、稀释抗体来控制。这是最重要的一条;
           一抗用多克隆抗体易出现非特异性着色,建议试用单克隆抗体看看;
           内源性过氧化物酶和生物素在肝脏、肾脏等组织含量很高(含血细胞多的组织),需要通过延长灭活时间和增加灭活剂浓度来降低背景染色;
           非特异性组分与抗体结合,这需要通过延长二抗来源的动物免疫血清封闭时间和适当增加浓度来加强封闭效果;
           DAB孵育时间过长或浓度过高;
           PBS冲洗不充分,残留抗体结果增强着色,在一抗、二抗或SP孵育之后的浸洗尤为重要;
           标本染色过长中经常出现干片,这容易增强非特异性着色。

    背景过深的原因

    可能是一抗浓度高;需要调整DAB孵育时间;考虑血清封闭的时间是否过短;适当增加抗体孵育后的浸洗次数和延长浸洗时间等。

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