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生物透射电镜(生物TEM)

项目介绍
样品要求
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常见问题

生物透射电镜(生物TEM)

满意度: 100%

仪器型号:

日本-Hitachi-HT7800,日本-Hitachi-HT7700,日本-JEOL-JEM-2100Plus,日本-JEOL-JEM-1400Flash ,美国-RMC-Pover Tome XL

日本-Hitachi-HT7800,日本-Hitachi-HT7700,日本-JEOL-JEM-2100Plus,日本-JEOL-JEM-1400Flash ,美国-RMC-Pover Tome XL

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平均5.0-15.0个工作日

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¥504.00 ¥700.00

项目推荐

负染色技术

已下单1580| 满意度99%

平均周期7.0个工作日

负染色技术

   负染色技术是一种制备电子显微镜样品图像呈现复反差的技术。用于观察样品中的颗粒性物质或生物大分子。用金属盐对铺展在载网上的样品进行染色,使整个载网都铺上一层重金属盐,而有凸出颗粒的地方则没有染料沉积。染色后,在电镜下观察时,被观察的对象为亮的,背景为暗的。负染色是只染背景而不染样品,与光学显微镜样品的染色正好相反。目前最常用的负染液是醋酸铀或者磷钨酸

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X射线光电子能谱(XPS)

优惠价 ¥54.00 ¥90.00起

平均周期5.0个工作日

X射线光电子能谱(XPS)

1. X射线光电子能谱(XPS)可测试全谱、精细谱、俄歇谱、价带谱,也可刻蚀后采谱得到深层的信息;2. X射线光电子能谱(XPS)按元素个数收费(需要包含必测元素C,不能测试H、He元素);一个元素默认测一个轨道,若测试多个轨道计为多个元素;一个样品默认一个测试位置,若测试多个位置计为多个位置;3. XPS定量为半定量数据。原子百分含量小于5%的元素可能测不出明显信号;4. 测试默认单色化Al靶(AlKαsource),能量1486.68eV;

新客专享

X射线多晶衍射(XRD)

优惠价 ¥24.00 ¥40.00起

平均周期4.5个工作日

X射线多晶衍射(XRD)

当一束单色X射线入射到晶体时,由于晶体是由原子规则排列成的晶胞组成,这些规则排列的原子间距离与入射X射线波长有X射线衍射分析相同数量级,故由不同原子散射的X射线相互干涉,在某些特殊方向上产生强X射线衍射,衍射线在空间分布的方位和强度,与晶体结构密切相关,每种晶体所产生的衍射花样都反映出该晶体内部的原子分配规律。这就是X射线衍射的基本原理。

350/h起

云现场/现场-场发射扫描电镜(SEM)

已下单46550| 满意度100%

平均周期6.5个工作日

云现场/现场-场发射扫描电镜(SEM)

    扫描电子显微镜(SEM)是一种介于透射电子显微镜和光学显微镜之间的一种观察手段。其利用聚焦很窄的高能电子束来扫描样品,通过光束与物质间的相互作用,来激发各种物理信息,对这些信息收集、放大、再成像以达到对物质微观形貌表征的目的。此外,扫描电子显微镜和其他分析仪器相结合,可以做到观察微观形貌的同时进行物质微区成分分析。

项目介绍

样品要求

结果展示

常见问题

论文致谢
  • 何**

    西南大学北培校区

    Biomatierals

    原文链接  A robust Au@Cu2-xS nanoreactor assembled by silk fibroin for enhanced intratumoral glucose depletion and redox dyshomeostasis

    影响因子:15.304

    现金奖励:566.00

    申请时间:2023-02-21 10:11:32

  • 胡**

    四川大学

    Theranostics

    原文链接  Controlled intracellular aggregation of magnetic particles improves permeation and retention for magnetic hyperthermia promotion and immune activation

    影响因子:11.600

    现金奖励:283.00

    申请时间:2023-03-27 14:35:25

  • 张**

    三峡大学

    Inorganic chemisty frontiers

    原文链接  Facile synthesis of three-dimensional Co/N co-doped carbon nanocuboid for enhanced oxygen reduction reaction

    影响因子:7.779

    现金奖励:366.00

    申请时间:2023-03-09 19:13:54

预约须知

1.样本要求:仅接收2.5%戊二醛固定液固定后的生物样品

(1)细胞样品:用1.5ml的尖底管,离心成团(至少黄豆大小),加入新鲜的固定液(固定液加满离心管,使样品完全浸没在固定液中),放置于4°C固定12h后,用泡沫盒加冰袋低温保存运输。 (细菌样品要求同细胞

(2)组织样本:肠、血管、皮肤、肌肉等有方向性样本需切成1mm*3mm*0.5mm长方体小块(如下图B),要观察的面为横切面(1mm*0.5mm),使用2mL离心管加满2.5%戊二醛固定液;无方向性的组织,如肝脏、肾脏、肺脏等可切成1mm³立方体小块(如下图A),使用2mL离心管加满新鲜的2.5%戊二醛固定液,放置于4°C固定12h后,用泡沫盒加冰袋低温保存运输。注意:样本管与冰袋隔开,避免固定液结冰。固定液渗透能力有限,超出此范围后组织会无法完全固定,后续实验无法完成,请务必重视此过程。

           特别注意:取材时尽量精确到需要观察的目的部位(如观察肾小球取肾皮质;观察胰岛取胰岛丰富的胰尾;皮肤,肠胃等在固定液中易打卷的组织可将组织粘在滤纸上进行固定)。



(3)打印填写完整的预约单或送样单和样品一起寄送;

(4)不做磁性样本。

2. 特别注意:是否需要包埋、切片或者负染;形貌拍摄由于其特殊性,老师会尽力拍摄,但无法保证一定会拍到您预期效果的图片,敬请理解!

3.不接收含有坚硬材料的样本,客户需对样品信息的真实性负责,若故意有所隐瞒,在测试过程中对设备造成损坏等一切后果将由您全部承担!

4. 提供10张拍摄照片(不提供分析服务),如需更多照片请提前与工作人员沟通确认,并且会产生额外费用,请悉知!如有其他疑问,请联系前期对接的技术顾问。




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项目介绍

生物透射电镜是观察生物细胞样品内部形态的重要工具,其电压在80-120kv可以降低生物样品因高能电子束辐射而损伤的影响,同时依赖于生物样品制备技术的发展,如超薄切片技术、负染色技术、冷冻制样技术、细胞化学技术等,广泛应用于组织学、细胞学、病毒学、病理学及材料学等多个学科的研究中,一般用来观察细胞整体结构、细胞膜细胞壁细胞器的变化、材料进入细胞内部的分布情况或者细胞应付外界刺激产生的自噬小体等结构,以及外界生物入侵的侵染结构等等。





样品要求

1、细胞样品用1.5ml的尖底管,离心成团(至少黄豆大小),加入新鲜的固定液(固定液加满离心管,使样品完全浸没在固定液中),放置于4°C固定12h后,用泡沫盒加冰袋低温保存运输。 (细菌样品要求同细胞)

2、组织样本:肠、血管、皮肤、肌肉等有方向性样本需切成1mm*3mm*0.5mm长方体小块,要观察的面为横切面,使用2mL离心管加满新鲜的2.5%戊二醛固定液;无方向性的组织,如肝脏、肾脏、肺脏等可切成1mm³立方体小块,使用2mL离心管加满固定液。放置于4°C固定12h后,用泡沫盒加冰袋低温保存运输;

        动物组织取材流程及要求

        取材流程:动物麻醉或断头急性处死,解剖取出所需的器官或组织,生理盐水简单冲洗血液及组织液。按要求将组织切成1mm³左右小块,固定于组织及细胞电镜专用2.5%戊二醛固定液中。

       固定方式有两种:

      a: 浸泡固定:适用于一些能允许在短时间内停止供血而仍保持其功能和结构的器官或组织,以及一些病理检查的样品。其方法是经解剖 (或手术)尽快从机体中取出所需组织,并按取材要求,把组织切成小块,放入小瓶子内作常规固定。

      b: 血管灌注固定:适用于取材较复杂或对缺氧较敏感的器官或组织,须采用血管灌注固定。灌注固定一般通过供血的动脉进行,小动物也可经左心室或升主动脉穿刺,行全身灌注。可根据动物的大小选用全身灌注或局部灌注的方式。参考方法:首先用50毫升生理盐水(37℃)清洗血液,接着用50毫升多聚甲醛固定液(37℃)快速灌注固定,然后用250-300毫升冷固定液(4℃)慢速灌入,持续10-15分钟后取材,置组织于同样固定液中,在4℃冰箱中固定。

3、打印填写完整的预约单或送样单和样品一起寄送;

4、不做磁性样本。


结果展示

   


生物样品透射电镜取材注意事项

       取材是电镜实验的第一步,其操作成功与否直接关系到电镜结果的效果及成败。为了得到好的结果,请务必按要求做好取材!取材基本要点:快(1min)、冷(4℃)、小(1 mm3)、净(无杂质)、准(部位准确)。不同的样品,取材细节上有很大区别!

(一)动物组织取材流程及要求

取材流程动物麻醉或断头急性处死,解剖取出所需的器官或组织,生理盐水简单冲洗血液及组织液。按要求将组织切成1mm³左右小块,固定于组织及细胞电镜专用2.5%戊二醛固定液。

图片 1.png

取材要求:

1)位置:肝、肺、脾等无需定位组织取1mm³组织,3-5块;需要定位组织如骨骼肌、肾、肠、血管、胰岛等组织取材大小为0.5mm×1mm×3mm左右的长条状,且保证观察结构在组织块中。

2)操作:试剂、容器、器械提前4℃预冷;组织离体后,1min内浸入戊二醛固定液。取材时,可提前准备一个载玻片(硬卡纸),滴几滴戊二醛固定液,把标本浸在液滴中修整至合适大小(时间可稍长),用牙签挑出3~5粒标本,放入1.5ml尖头EP管。将修整好的标本块放入戊二醛固定液后,普通4℃冰箱保存。

(二)细胞取材流程及要求

取材流程:细胞直接刮下不可胰酶消化,会造成细胞损伤,细胞悬液离心,弃上清,PBS洗2次(敏感的细胞直接固定,不洗),低速(1000-3000rpm)离心成团,加入组织及细胞电镜专用2.5%戊二醛固定液4℃过夜后快递。悬浮细胞、菌液可直接视为细胞悬浮液操作。固体培养基培养的菌可直接将菌落挑到PBS中,后续操作一致。

图片 2.png

取材要求:

1)细胞数量充足(6cm10cm皿长满),离心后在EP管中黄豆大小

2)缓冲液、戊二醛固定液等PH7.3-7.44℃提前预冷;

3)贴壁细胞连着培养基用细胞刮斜着快速刮下,不要反复来回刮;

4)细胞悬液转入离心管,1000-3000rpm离心成团,弃上清,加PBS,将细胞转入1.5mL尖头EP管,再次离心后弃上清。再加PBS重复上述步骤,最后加2.5%戊二醛固定,4℃保存。操作轻柔,尽量保证细胞不散开。(转速及时间请结合细胞情况,尽量低转速、短时间,以细胞离心成团为准!(PBS 清洗时间过长,易造成细胞损伤)

(三)植物组织取材及要求

取材流程:PBS冲洗样品,确保无泥沙等污染物。然后用锋利刀片或剪刀将样品切成合适大小,装入预冷的植物及细菌电镜专用2.5%戊二醛中。不需要定位的样品切成1立方毫米大小(如叶片、果实、花粉等),需要定位的样品,切成0.5mm×1mm×3mm的长条状(茎、根、表皮等)随后抽气,让组织能沉淀到管底。(简易抽气方法:将植物组织同固定液一起倒入注射器,用乳胶手套食指堵住注射器出口,右手拉动针栓,将注射器口垂直向上,松开食指,右手轻推针栓使液面上的气泡从注射器口排出,反复多次,直至组织沉入固定液。)

图片 3.png

(四)其他样品

悬浮细胞、细菌可视为细胞悬液操作。固体培养的细菌,可视为被切小的组织块,直接用牙签挑取3-5个菌落即可。外泌体、纳米材料、脂质体、病毒颗粒等负染样品,不需要固定,新鲜样本保持低温运送。

(五)样本储存运输标准:

储存:样本取材后,4℃保存时间不超过1个月。

运输:固定液充满EP管,封口膜封口,气泡膜或报纸包裹厚一些。最后泡沫盒+冰袋的方式运输,冰袋2-3个(-20℃冰袋,不要太多),一定要与样品隔开。特殊样品如脂肪、植物等用纱布将样品压到液面以下,保证充分固定。(见下图)


参考图:




常见问题
植物的根部为什么有时看不到细胞核?

植物细胞的细胞核相对比较小,不好切,切片的时候有可能没有切到,所以在观察透射电镜的时候会发现看不到细胞核。

切片染色的目的是什么?

 由于生物样品主要由碳、氢、氧、氮等轻元素组成。这些元素原子对电子的散射能力很弱,相互之间的差别也很小。尤其生物超薄切片被树脂所包埋,这些包埋树脂对电子的散射能力与样品本身差别很小。因此生物样品超薄切片观察时像的反差极弱。为了提高图像的反差,要对超薄切片进行电子染色。这里所谓电子染色是根本不同于光学显微镜的染色,它是利用重金属盐(如铅盐、铀盐等)与细胞的某些成分或结构结合,由于重金属对电子散射能力很强,使那些与其结合的结构或成份对电子散射能力增强,从而达到提高样品本身反差的。目前最常用的染色剂是醋酸铀和柠檬酸铅染色液。

2.5%戊二醛固定液如何配置?

市售25%戊二醛水溶液                10ml

0.2M磷酸盐缓冲液(pH7.0)      50ml

蒸馏水加至                                  100ml

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