光致发光、荧光光谱、紫外-可见吸收光谱
2021-11-30 17:18:37 0 4015
Q: 光致发光和荧光是一回事吗? A: 应该说荧光是光致发光的一种,光致发光包含的范围更大,光致发光包括荧光和磷光。光致发光和荧光都是因电子跃迁产生的电磁辐射(如可见光),但是光致发光的激发源是另一种高能辐射波(如短波光源)。而荧光的激发源可以是其它类型的能源(如电子、X射线等)。故虽然两者的结果相同,但是还有区别的。 Q: 原子荧光光谱法和荧光光谱法是一样的吗? A: 不一样,首先从原理说,原子荧光光谱是基于基态原子吸收特定波长光辐射的能量而被激发至高能态,受激原子在去激发过程中发射出的一定波长的光辐射的原理造成的可以检测元素。 荧光光谱法: 荧光激发光谱:让不同波长的激发光激发荧光物质使之发生荧光,而让荧光以固定的发射波长照射到检测器上,然后以激发光波长为横坐标,以荧光强度为纵坐标所绘制的图,即为荧光激发光谱。 荧光发射光谱的形状与激发光的波长无关 。 荧光发射光谱:使激发光的波长和强度保持不变,而让荧光物质所发出的荧光通过发射单色器照射于检测器上,亦即进行扫描,以荧光波长为横坐标,以荧光强度为纵坐标作图,即为荧光光谱,又称荧光发射光谱。 在应用上,原子荧光光度计主要进行重金属检测;而荧光光谱仪主要是是研究小分子与核酸相互作用的主要手段。通过药物与核酸相互作用,使DNA与探针键合的程度减小,反映在探针荧光光谱的改变,从而可以了解药物和核酸的作用机理。 Q: 分子荧光和原子荧光的区别 A: 分子荧光和原子荧光都是光致发光,二者都是价电子跃迁,但因为前者会伴随有振动能级和转动能级的跃迁,所以是连续发射,而后者是分立的线发射; 前者分析物一般是处于溶液状态,后者需要转化成气态原子; 前者测定的主要是含有共轭不饱和体系的化合物,而后者测定的主要是金属元素的含量; 前者采用的主要是氙灯或高压汞灯,而后者采用的则主要是高强度空心阴极灯或无极放电灯。 Q:分子荧光光谱与紫外-吸收可见光谱的区别? A: 1.原理区别:①紫外-可见吸收光谱是由于物质吸收紫外-可见辐射能后引起分子价电子跃迁所产生的,可用于物质的定性和定量分析。 电子跃迁的同时,伴随着振动转动能级的跃迁;带状光谱紫外光谱、可见光谱和红外光谱一起统称为分子光谱。 分子吸收光谱的产生 转动能级间的能量差;振动能级的能量差;电子能级的能量差。 ②分子荧光是指利用某一波长的光线照射试样使试样吸收这一辐射,然后再发射出波长相同或波长不同的光线,根据光线的特性和强度对荧光物质进行定性或定量的分析。 2.光源的区别:①紫外-可见吸收光谱光源(提供能量激发被测物质分子,使之产生电子光谱) 在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱,具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。 可见光区:钨灯作为光源,其辐射波长范围在320~2500 nm。 紫外区:氢、氘灯。发射180~400 nm的连续光谱。 ②测量荧光的仪器主要由四个部分组成:激发光源(氙灯、高压汞灯)、样品池、单色器系统、检测器。特点:光源、液槽和检测器不在一条直线上。 3.检测方式的不同:①紫外吸收是水平的检测,②而荧光通常是垂直检测。
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